作者:孙礼进; 张忠宝; 李浩; 陈咏梅; 张智; 李...尿素酶b亚单位高密度发酵摇瓶发酵
摘要:探究重组大肠杆菌产尿素酶B(urease B subunit,UreB)的高密度发酵条件。通过实验室摇瓶和30 L发酵罐对UreB基因工程菌的发酵条件进行优化。结果表明:30 L发酵罐中以TB培养基为发酵培养基,接种量为5%,发酵温度为37℃,pH为6. 8,溶氧量为30%左右,培养至2 h开始恒速流加50%甘油,4 h流加50%酵母提取物和50%胰蛋白胨,并加入终浓度为0. 5 mmol/L的异丙基β‐D‐硫代半乳糖苷(isopropylβ‐D‐thiogalactoside,IPTG),诱导表达4 h,结束发酵,所得菌体干物质约为25. 7 g/L,UreB表达量为31. 4%。此工艺可以提高UreB的产量。
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