作者：韩旭; 田野; 田大力atp结合盒转运子e1重组蛋白表达
摘要：目的构建谷胱甘肽S-转移酶（GST）标签的ATP结合盒转运子E1（ABCE1）基因的原核表达载体pGEX-4T-1-ABCE1,通过转化技术,诱导GST-ABCE1重组蛋白表达。方法通过基因克隆技术构建融合ABCE1基因的原核表达载体,经酶切和测序等方法进行检测。通过转化技术,在E.coli BL21（DE3）中诱导GST-ABCE1重组融合蛋白表达。经酶切,Western blot和质谱测序等方法对该重组蛋白进行鉴定。结果 ABCE1基因片段成功插入pGEX-4T-1原核表达载体中,双酶切和测序后,经Gen Bank blast比对验证,证实ABCE1基因插入载体部位正确,碱基序列正确。凝血酶酶切检测重组蛋白GST-ABCE1得到72 000大小的特异条带,该条带可以被ABCE1抗体识别,质谱检测得到ABCE1蛋白的特异性序列,该序列评分138分（P〈0.05）。结论 pGEX-4T-1-ABCE1原核表达载体质粒构建成功,并成功诱导GSTABCE1重组蛋白表达,为继续研究ABCE1在肺癌中的作用机制奠定基础。
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