作者：邹卉; 吴建华; 方颖支撑脂双层膜荧光漂白恢复扩散系数流动性能
摘要：支撑脂双层膜(SLBs)因其结构与功能均类似天然细胞膜而广泛应用于生物医学及生物工程研究。本文以玻璃载玻片为基底,以1, 2-油-锡-磷脂-3-卵磷脂(DOPC)与{亚氨基二乙酸丁二酰(镍盐)}(DGS-NTA)为原料,采用荧光漂白恢复技术(FRAP)研究原料配比、制备方法、漂白区域大小及蛋白加载浓度对SLBs流动性及扩散系数的影响。结果表明:①声波破碎法优于薄膜挤压法,预处理脂质体得到的小囊泡粒径更小、更均匀,并且SLBs形成过程中须避免接触空气;②膜的荧光恢复速度和扩散系数随漂白区域的增大而减小,随着DOPC与DGS-NTA摩尔质量比由98∶2变为84∶16,SLBs流动性及荧光恢复率逐渐减小,当两者配比为82∶18时,膜已失去流动性;③加载蛋白浓度在10~40 nmol·L–1范围时,SLBs的荧光强度随蛋白浓度线性增加,蛋白在SLBs上具有很好的流动性。该研究为细胞膜分子之间的相互作用及后续信号响应的研究搭建了一个良好的生物膜平台。
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