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整合素beta1亚单位对肝癌细胞与IV型胶原黏附与趋化行为的影响

作者:傅遍红; 吴泽志; 董澄; 秦建iv型胶原hcccd29细胞整合素亚单位黏附力微管生长曲线表达率

摘要:采用微吸管实验技术,测定肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)细胞与IV型胶原裱衬表面的黏附力;进一步加入针对整合素betal亚单位(CD29)的单克隆抗体(Anti-CD29)处理HCC细胞,观察Anti-CD29对细胞与IV型胶原裱衬表面的黏附力的影响。采用双微吸管实验法进行HCC细胞趋化实验,在两侧微管内加入相同浓度(600μg/ml)的IV型胶原,并引导微管尖端与同一细胞紧密接触,动态观察细胞两侧伪足形成过程;在一侧微吸管内加入20μg/ml Anti-CD29,考察betal整合素亚单位阻断对HCC细胞伪足形成的影响。利用流式细胞仪对HCC细胞表面整合素betal亚单位的表达进行分析。结果表明,HCC细胞与5μg/mlIV型胶原裱衬表面之间的黏附力为932±134(×10^-10N,n=60),加入5μg/ml Anti-CD29黏附力减小到449±119(×10^-10N,n=60);加入10μg/ml Anti-CD29时黏附力减小到220±78(×10^-10N,n=55)。双微吸管趋化实验表明:两侧微吸管加入相同浓度IV型胶原,细胞向两侧微吸管均有伪足形成;在此基础上,微吸管加入Anti-CD29的一侧,HCC细胞伪足生长曲线呈现明显的抑制,而未加入Anti-CD29的微吸管一侧与加入的对侧相比,该侧细胞的伪足明显增加。流式细胞仪分析表明,所研究细胞整合素betal亚单位表达率达95.78%。上述结果表明,整合素betal亚单位是联系HCC细胞与IV型胶原裱衬表面黏附以及HCC细胞对IV型胶原趋化性伪足形成的重要受体基础。

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生物医学工程学

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