作者：侯建华; 王翠艳; 方园园; 杨少辉; 薄涛; ...糖尿病毕赤酵母短肽分泌表达
摘要：利用毕赤酵母表达治疗糖尿病的短肽药物GLP-1（胰高血糖素样肽-1）。以pUC18GLP-1为模板进行PCR。将获得的GLP-1基因片段克隆到pMD18T-vector上，然后将SinaⅠ和NotⅠ双酶切获得的基因小片段插入到表达载体pPIC9上，完成表达载体pPIC9GLP-1的构建．SacⅠ线性化重组质粒，通过醋酸锂转化法转化毕赤酵母GS115感受态细胞，成功构建了能够分泌抗二肽酶Ⅳ降解的长效促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌株。结果表明毕赤酵母6号菌株的GLP-1分泌表达产量最高可达100．00mg／L，实现了GLP-1在毕赤酵母中的表达，为进一步开发治疗糖尿病新型短肽药物的研究奠定了基础。
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