作者：钟亚迪; 贾俊婷; 范瑞; 马丽敏; 马玉媛; ...人细小病毒b19病毒蛋白真核表达质粒
摘要：目的：构建人细小病毒B19（B19V）基因组编码蛋白的真核表达质粒，并对其表达进行鉴定，为研究B19V蛋白功能提供支持。方法：设计并合成B19V基因组编码蛋白VP1、VP2、NS1、11kDa、X、7.5kDa和VP1独特区域（VP1u）的PCR扩增引物，以B19V感染性克隆pB19-M20为模板，PCR扩增基因组编码蛋白的核苷酸序列，将其插入真核表达载体pcDNA3.1（+）-HA-Flag，并进行酶切鉴定和核苷酸序列测定；将鉴定正确的重组质粒转染HEK293T细胞，通过免疫印迹分别检测病毒蛋白的表达情况。结果：构建了B19V7种蛋白的真核表达质粒，免疫印迹鉴定表明均可表达相应的目的蛋白。结论：构建了B19V7种蛋白的真核表达质粒，为深入研究B19V蛋白功能及其在致病机制中的作用奠定了基础。
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