作者：胡桂萍; 贾宪波; 刘波; 尤民生芽胞杆菌蛋白提取破碎方法
摘要：目的：比较不同破碎方法下3种芽胞杆菌菌体蛋白的提取效果。方法：以菊酯类农药降解菌巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、弯曲芽胞杆菌为研究对象，以裂解液为提取介质，分别采用超声波破碎法、水煮法和机械破碎法提取芽胞杆菌蛋白，并通过革兰染色电镜观察菌株破碎程度，用SDS-PAGE和Bradford法测定蛋白浓度。结果：革兰染色电镜观察发现玻璃珠机械破碎法对3种芽孢杆菌的细胞壁破碎程度最明显，其次为超声波破碎法，水煮法破碎效果不明显。SDS-PAGE和Bradford法测定结果表明，巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、弯曲芽胞杆菌经玻璃珠机械破碎后，提取的蛋白图谱条带清晰，丰度高，重复性好，含量分别为20.247、19.902和18.893 mg/mL；经超声波破碎提取的蛋白图谱条带较清晰，丰度一般，重复性不好，含量分别为10.572、9.438和10.424 mg/mL；经沸水浴破碎提取的蛋白图谱条带模糊，丰度低，重复性差，含量分别为1.366、1.119和1.136 mg/mL。结论：玻璃珠机械破碎法是破碎3种芽胞杆菌的最优方法，破碎后提取的蛋白含量高，条带清晰，重复性好。
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