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甲基营养菌MP688中启动子探针载体的构建

作者:杜宝华; 葛欣; 王文溪; 熊向华; 汪建华; ...甲基营养菌半乳糖苷酶启动子活性检测载体启动子活性测定

摘要:目的:以半乳糖苷酶基因作为报告基因,构建适于探测甲基营养菌MP688启动子的载体。方法:通过PCR扩增半乳糖苷酶基因片段,连入质粒pCM66构建启动子活性探针载体pMPlacZ。根据MP688的基因组序列设计引物,通过PCR扩增5个pqqA基因、核糖体亚基A基因(rpsA)、核糖体亚基B基因(rpsB)、伴侣分子groel基因和甲醇脱氢酶基因(mdh)等共9个基因的启动子序列,将这9个启动子片段连入pMPlacZ进行活性测定。结果:构建了一个适于探测甲基营养菌MP688的启动子活性的载体pMPlacZ;利用构建的报告系统对MP688中9个基因的启动子进行了活性比较,得到3个与吡咯喹啉醌合成相关的强启动子。结论:构建的启动子活性检测载体可以有效、灵敏地用于MP688强启动子的筛选和启动子活性检测。

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生物技术通讯

《生物技术通讯》(双月刊)创刊于1989年,由军事医学科学院主管,军事医学科学院生物工程研究所主办,CN刊号为:11-4226/Q,自创刊以来,颇受业界和广大读者的关注和好评。 《生物技术通讯》主要报道生物技术(生物工程)及相关学科领域的最新科研成果与进展,尤其关注生物技术在生物医学、医药工业、农业、环保、卫生、食品等各领域的应用。

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