作者:孙卫国; 刘农乐; 丁红梅; 陈留存; 赵强; ...融合表达二硫键氧化还原酶生物活性
摘要:目的:通过原核融合表达,获得具有生物活性的重组人神经生长因子(hNGF)的B亚基。方法:分别以大肠杆菌二硫键形成蛋白家族(Dsb)中的DsbA、DsbC蛋白及硫氧还蛋白(Trx)为融合分子,与hNGFB亚基在原核表达系统进行融合表达,优化融合蛋白的复性条件,获得可溶性rhNGFp亚基融合蛋白;通过鸡胚背根神经节培养实验鉴定各融合蛋白的生物活性。结果:在获得的3种融合蛋白中,只有DsbA-L-NGF表现较高的、类似小鼠NGF的生物活性,可观察到其促进鸡胚被根神经节突起生长。结论:人神经生长因子B亚基与DsbA融合蛋白具有良好的生物活性。
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