作者：隋洪帅; 李林; 鲍作义; 李敬云apobec3g蛋白原核表达蛋白纯化溶茵酶裂解超声破碎
摘要：目的：原核表达重组APOBEC3G蛋白，为其功能及免疫原性研究奠定基础。方法：提取H9细胞全细胞基因组RNA，通过RT-PCR获得目的基因，经纯化、酶切后克隆到原核表达载体pET32a中，转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株获得表达工程菌株，并对表达条件和纯化条件进行优化；利用Western Blot分析鉴定目的蛋白。结果：构建了APOBEC3G蛋白的原核表达载体Apo-His-pET32a，并在大肠杆菌中获得高表达，目的蛋白以可溶性蛋白形式存在；经Ni-NTA亲和层析柱一步纯化，获得了高纯度的重组APOBEC3G蛋白，蛋白浓度可达1．2mg／mL；Westem Blot显示获得了目的蛋白。结论：在原核表达系统中表达、纯化了可溶性APOBEC3G蛋白，为进一步对其进行免疫原性和功能研究奠定了基础。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
