作者：刘蕾; 王慧; 颜光涛; 史晶; 包士中; 荫俊人骨形成蛋白成熟肽巴斯德毕氏酵母分泌表达
摘要：目的：利用甲醇酵母表达系统，构建重组人骨形成蛋白-7（rhBMP-7）成熟肽的基因工程菌，并实现其分泌表达。方法：采用PCR方法，依据GenBank数据库中hBMP-7成熟肽序列（Accession No．NM_001719）设计并合成一对引物，从已构建的含hBMP-7的克隆载体中扩增获得人骨形成蛋白-7成熟肽基因片段，并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒，电转化巴斯德毕氏酵母SMD1168，于30℃进行甲醇诱导分泌表达，经筛选获得rhBMP-7成熟肽表达株，并进行了表达产物的活性测定。结果：表达产物存在于培养上清中，约占分泌蛋白总量的8％。经Western印迹分析可以检测到重组表达产物，ELISA检测其具有特异性结合活性。结论：构建了重组人骨形成蛋白-7成熟肽的基因工程菌并在甲醇酵母中实现了分泌表达，为进一步的活性及功能研究奠定了基础。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
