作者:贾帅争; 胡锦辉; 郑晓玲; 吕丽萍; 刘敏霞...丙型肝炎病毒低密度脂蛋白受体cd81浸入诱导蛋白l水动力转染
摘要:为建立人低密度脂蛋白受体(LDLR)、CD81和浸入诱导蛋白L(Sip-L)等多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,首先分别构建了白蛋白启动子调控的人LDLR、CD81和Sip-L基因的小鼠肝脏组织特异性表达载体,将3种质粒同时采用水动力转染技术导入小鼠体内,RT-pCR和免疫组化技术检测转入体内基因的表达及持续时间.结果表明,转染8 h后即可检测到3种基因在体内转录,人LDLR和CD81在转染1~4d后可在50%~90%的肝细胞中高效表达,7 d后检测不到目的基因表达.为了进一步延长转染基因在小鼠体内的表达时间,又分别构建了人LDLR、CD81和Sip-L的染色体整合型表达载体,将它们与噬菌体ФC31的整合酶表达载体同时水动力转染小鼠,3种基因在体内表达时间可持续到转染后25d.以上结果表明建立了多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,为确定这些分子能否使小鼠感染HCV奠定了基础.
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