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大肠杆菌表达的重组人骨形成蛋白-7的复性

作者:王雪; 宋长征复性重组人骨形成蛋白大肠杆菌表达样品溶液nih3t3细胞人工蛋白质分子伴侣

摘要:带有pBV221-hBMP-7的E.coli表达得到的rhBMP-7以不溶的包涵体形式存在,用高浓度的变性剂溶解后,经过DEAE-FF纯化,得到高纯度的目的蛋白,达95%以上.分别用尿素浓度梯度降低法、添加促复性剂及人工分子伴侣法对蛋白质进行复性,并通过不同方法对复性结果进行比较.Westem b1ot中辉度扫描结果显示,GSH/GSSG法样品二聚体/单体比例为79.5/20.5,尿素浓度梯度降低法二聚体/单体比例为73.6/26.4,表明GSH/GSSG法复性样品溶液上清中含较高比例的蛋白质二聚体.根据不同复性样品对NIH3T3细胞ALP活性影响大小的比较结果,氧化还原剂最有助于二聚体的形成,蛋白质活性最高.

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生物技术通讯

《生物技术通讯》(双月刊)创刊于1989年,由军事医学科学院主管,军事医学科学院生物工程研究所主办,CN刊号为:11-4226/Q,自创刊以来,颇受业界和广大读者的关注和好评。 《生物技术通讯》主要报道生物技术(生物工程)及相关学科领域的最新科研成果与进展,尤其关注生物技术在生物医学、医药工业、农业、环保、卫生、食品等各领域的应用。

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