作者:何莉; 朱旭东; 毛志勇; 朱恒奇; 黄培堂转录因子蛋白抗体制备诱导表达亚克隆细胞内et纯化cdna序列总rna
摘要:用RT-PCR方法从HeLa细胞总RNA中扩增转录因子CTCF的cDNA序列,克隆至pGEM-T Easy载体上.将CTCF蛋白N段的编码序列亚克隆至pET22b(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用镍柱进行亲和纯化.用纯化后的CTCF N段蛋白免疫家兔,获得CTCF的多克隆抗体,进而用于细胞内CTCF蛋白的免疫印迹检测.
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