作者：许志茹; 李玉花cdna文库质粒克隆特异基因蛋白质
摘要：利用α--互补(X-gal+IPTG)从cDNA文库中筛选特异克隆,以此去除含有未插入片段和插入片段小的克隆.运用展库的方法,通过辅助噬菌体对文库中多个载体的切割,将载体以质粒的形式转化到大肠杆菌中;同时对质粒DNA碱裂解提取方法做了改进,建立了一种简单实用的大量提取质粒DNA的方法.该方法利用特定的蛋白质吸附膜吸附提取过程中的蛋白质,从而去除了使用酚-氯仿抽提蛋白质的复杂过程,减少了质粒DNA的损失,是一次性获得大规模质粒DNA的有效方法.获取的质粒DNA样品在纯度和浓度上都可以满足测序、PCR及Southern杂交等分子生物学实验的要求.
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