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E.coli木糖异构酶基因的克隆及表达条件的优化

作者:许伟; 严明; 李永健; 李艳; 许琳xyla基因木糖异构酶克隆表达

摘要:采用PCR技术以大肠杆菌JM109基因组DNA为模板扩增得到木糖异构酶基因xylA,连接到载体pET-22b(+),得到重组质粒p ET-22b(+)-xylA.将此重组质粒转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,重组菌株经IPTG诱导后,通过半胱氨酸-咔唑法测得木糖异构酶活力.每mL发酵液中重组菌株显示出酶活力约为0.84 U.SDS-PAGE电泳结果显示出明显的5 ×104(相对分子质量)特异性蛋白质条带.

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生物加工过程

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