L78部分氨基酸残基对SERCA1a钙转运功能的影响

作者：王国丽 DAIHO Takashi YAMASAKI Kazuo DA...p型atp酶钙离子atp酶serca定点诱变反应循环

摘要：跨肌浆网膜的钙离子ATP酶SERCAla可在水解ATP的同时逆浓度梯度从胞浆转运钙离子入肌浆网，引发收缩的骨骼肌细胞舒张．目前对SERCAla结构与功能的研究，要领先于对其他P型离子转运ATP酶的研究．为了解SERCAla跨膜螺旋M7与M8膜内侧连接部Linker78（L78）的功能，我们评估了L78部分氨基酸残基突变对SERCAla反应循环的影响，发现：除G864A之外的所有突变体均可不同程度地降低钙离子转运速率；G862或P863氨基酸残基的突变导致SERCAla的ATP酶活性显著降低或丧失，并引起由ATP或无机磷酸Pi生成的磷酸化酶中间体EP量显著减少；A893被P取代对SERCAla的影响与G862、P863突变相似；与野生型SERCAla相比，G864A与FMQ873—875单突变体ATP酶活性及EP生成量无明显差别．上述结果表明，M7、M8膜内侧连接部L78不仅与跨膜区钙离子转运过程密切相关，而且L78在GPG862．864处及A893附近的正确转折对胞浆结构域P的磷酸化也具有关键的远距离调控作用，提示L78的结构及柔度对SERCAla构象正常的周期性变化至关重要．

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