Ser84是spindlin1定位与功能发挥的关键位点

作者：丛斌 张鹏 王静雪 曾泉 陈琳 岳文 裴雪涛spindlin1突变细胞定位

摘要：spindlin1为作者所在研究组克隆并命名的肿瘤相关新基凶，之前研究表明spindlin1蛋白定位于细胞核，并有可能通过对TCF-4通路的调节参与对肿瘤细胞生长和周期的调控．为进一步探索spindlin1的作用机制，明确spindlin1结构与功能的关系，在生物信息学分析及晶体结构解析的基础上，构建系列突变表达载体，首先以spindlin1蛋白亚细胞定位为指标，观察野生型及系列突变体spindlin1蛋白的亚细胞定位，并进一步检测野牛型及突变体spindlin1对TCF-4荧光素酶报告基因转录活性的调控作用，以明确spindlin1定位与功能的关键位点．结果表明：Serl4＋Ser84、Ser84＋Ser99、Ser14＋Ser84＋Ser99位点Ser到Ala的联合突变能使野生型融合蛋白在细胞核内集中分布的特性消失，成为全细胞弥散分布，而Serl4、Ser84、Ser99各位点的单独突变或Serl4＋Ser99联合突变对spindlin1蛋白的细胞核内分布没有影响．与此同时，对TCF-4荧光素酶报告基因活性的分析表明，Serl4＋Ser84、Ser84＋Ser99、Serl4＋Ser84＋Ser99的联合突变使spindlin1对其活性的激活作用消失或降低．上述结果表明，Ser84是spindlin1细胞定位与功能发挥的关键位点，其作用发挥需要Serl4与Ser99的协助．

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