钙网蛋白122～180片段基因克隆、表达和活性分析

作者：陈宏; 张添元; 罗进贤; 胡志上钙网蛋白基因表达内皮细胞肿瘤生长血管血管生成抑制因子抗药性毒性

摘要：钙网蛋白是高等动物细胞中普遍存在的一种钙结合蛋白，近年发现它及其N端1～180位氨基酸能抑制内皮细胞生长和血管生成。为了寻找高效和小分子质量的血管生成抑制因子，用PCR技术扩增出钙网蛋白N端122～180位氨基酸的DNA序列，克隆进原核表达载体pET—3c，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导后，该片段以包涵体形式表达，表达量约占菌体总蛋白的35．4％，包涵体经变性溶解、复性和初步纯化后，纯化产物可以抑制人脐静脉内皮细胞的生长，鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成和小鼠原位黑色素瘤的生长。

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