作者：国微; 杨新朝; 闫尧; 姜锐低温保存毕赤酵母菌bfgf
摘要：目的:鉴定毕赤酵母菌bFGF转化株并筛选出表达量较高的菌株,为后续大规模发酵提供菌种。方法:对-80℃下保存的毕赤酵母菌bFGF转化株9D和X两个菌株,挑取单克隆在MD和MM平板上进行Mut^+Mut^s表型筛选,确定其表型;挑取单克隆:9d1~9d6、x1~x5进行YPD培养后测序,结果在NCBI上与bFGF基因进行比对。选取有bFGF基因表达的单克隆进行发酵,筛选出表达量较高的菌株。结果:从编号9d、x的毕赤酵母重组菌中挑取的99个单克隆均为Mut+型。测序结果显示:9d1、9d2、9d3、9d6、x2、x3、x4、x5均有bFGF基因表达,且9d3的bFGF表达量最高,为13.14ng/L。
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