作者：张海毅包涵体洗涤条件
摘要：目的:确定重组TAT_m-survivin(T34A)包涵体的洗涤条件。方法:将补料分批发酵得到的重组大肠杆菌破碎,得到TAT_m-survivin(T34A)粗制包涵体,探索pH、化学物质、尿素浓度、洗涤次数对包涵体洗涤的影响。结果:得到重组TAT_m survivin(T34A)包涵体的最佳洗涤条件为洗涤液成分为pH10.0甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(20mmol/L),内含100μmol/L巯基乙醇、0.5%Triton X-100、0.5mol/L尿素、1mol/L氯化钠和2.5mmol/L EDTA;洗涤次数为4次。结论:利用优化的洗涤条件进行洗涤后,包涵体的纯度达到85%左右,整体的回收率达到80%以上。
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