作者：王志方; 张学军; 王博; 周小云; 艾秀莲磷脂酰乙醇胺结合蛋白原核表达低温诱导雪莲
摘要：本实验旨在构建雪莲类PEBP基因原核表达载体，在大肠杆菌中表达并纯化类PEBP基因所编码的蛋白，为进一步研究奠定基础。将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到原核表达载体pET30（＋）上，转化感受态表达菌株BL21（DE3），低浓度IPTG低温诱导融合蛋白的表达，纯化产物，Western blotting鉴定目的蛋白。IPTG低温诱导PEBP，经SDS—PAGE分析，其相对分子量约为28kD，与预期相符，表达量约占菌体蛋白的26．8％，并且通过亲和层析纯化了重组融合蛋白，Western blotting鉴定为阳性。成功构建了原核表达载体pET-PEBP,获得了高效表达产物，并为进一步研究雪莲类PEBP基因的抗冻功能打下基础。
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