作者：刘宇鹏; 郑璞; 倪晔; 董晋军; 韦萍; 孙志...琥珀酸育种氟乙酸
摘要：琥珀酸是一种用于合成树脂、可降解塑料及许多化学中间体的重要绿色化工原料。为了提高琥珀酸的发酵产率，基于Actinobacillus succinogenes的代谢流量分布情况对其育种机制进行了研究。以Actinobacillus succinogenes CGMCC1593为原始菌株进行NTG诱变，挑选在含有50～100mmol／L氟乙酸平板生长较快的菌落，经过初筛和复筛，发现SF-9菌株产生更多琥珀酸且积累乙酸较少。以50g／L的葡萄糖为碳源，在5L发酵罐上进行分批发酵，该菌株发酵32h时琥珀酸产量（34．8g／L）提高了23．4％，琥珀酸，乙酸比率为9：1，副产物乙酸量比原始菌株降低了约50％。代谢流量分析（MFA）结果表明，PEP是影响琥珀酸合成的关键节点，PYR是影响乙酸等杂酸生成比例的关键节点，并且这两个节点均非刚性节点。通过氟乙酸抗性诱变，成功地筛选出了流向乙酸、甲酸和乳酸等杂酸的流量相对减少，而流向琥珀酸的流量明显增强的突变菌株SF-9。
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