作者：张道永; 杨爽; 吕树军; 闫继东; 朱天慧人骨形态发生蛋白2cho共转染c2c12碱性磷酸酶
摘要：构建真核表达载体pCDNA3．1（＋）-hBMP-2，与质粒pSV2-dhfr共转染CHO-dhfr-细胞，以含有700μg／mLG418的IMDM进行选择性培养，筛选抗性克隆，并用MTX扩增，提高rhBMP-2的表达量。收集的rhBMP-2蛋白进行Westem blot检测，还原蛋白样品电泳产生一条大小约为18kD的特异性条带，非还原蛋白样品电泳产生一条大小约为30kD的特异性条带，提示表达的rhBMP-2是经过糖基化修饰的，且以同源二聚体形式分泌表达。单细胞分离培养得到14株rCHO（hBMP-2）单克隆细胞株，ELISA法检测rhBMP-2表达水平，最高可达7．83μg／24h／106cells。活性分析结果表明，表达的rhBMP-2具有很强的生物学活性。
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