作者：黄慧珍; 王瑶; 陈士云; 王志华; 杨宝玉mars烟草转基因表达
摘要：从烟草基因组中克隆到两条新的MAR片段(M14和M17),序列分析表明,它们具有90%AT-box,A-box,T-box,碱基非配对区域,拓扑异构酶Ⅱ识别位点,弯曲DNA序列,复制起始序列和ATATTT等典型的MAR序列特征,并与原有MAR序列的特征不同.将它们分别构建到植物表达载体pCAMBIA2301 GUS基因(uidA)表达盒一侧及两侧,通过农杆菌介导转化烟草.组织化学染色法定性检测GUS活性表明,带有M14和M17的uidA基因在转基因烟草中稳定表达.GUS活性的定量检测表明,表达载体上uidA基因一端或两端连接有MAR的转化烟草中,GUS的表达水平与对照相比都有了明显提高,而uidA基因两侧连有MAR的载体提高表达水平的效果优于一端连有MAR的载体,可使GUS活性增强3.14倍,但不同转化个体之间表达水平的差异仍然明显.上述结果表明,所得DNA序列为两条新的MAR片段,并且具有提高转基因表达水平的功能.
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