作者：张晓梅; 唐雪明; 诸葛斌; 沈微; 饶志明; ...1重组大肠杆菌
摘要：利用PCR技术从大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出1.16kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到表达载体pEtac,得到重组载体pEtac-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达.SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量均为43 kD,同核酸序列测定所推导的值相符.对含有yqhD的基因工程菌进行表达研究表明:37℃,以1.0mmol/L IPTG诱导4 h,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到120 u/mg蛋白,而对照菌株的酶活力为0.5 u/mg蛋白.再将含甘油脱水酶基因dbaB和含1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的重组质粒共转化大肠杆菌JM109得到重组大肠杆菌JM109(pUCtac-dhaB,pEtac-yqhD),该菌株在好氧条件下,以1.0 mmol/L IPTG诱导可将50g/L甘油转化为38.0 g/L1,3-丙二醇.首次发现1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶在好氧条件下表现出较高的活性.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
