作者：曾瑞红; 龚伟; 方学平; 张振亚; 梅兴国中和抗体ctl
摘要：PCR扩增呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)M2蛋白的CD8+T细胞表位F/M2:81-95和RSV-G蛋白的B细胞表位片段G:125～225(简称G1),以一个Linker连接,插入质粒pET-DsbA中构建原核表达重组质粒,转染E.coli BL21(DE3)后成功表达了融合蛋白DsbA-G1-Linker-F-M2:81-95(简称D-G1LF/M2),Western-blot结果表明该融合蛋白是RSV特异性的,采用Ni+螯合亲和层析法纯化变性的包涵体溶液,经梯度透析法复性,用该蛋白免疫BALB/c小鼠,结果表明被免疫小鼠肺部及血清中产生了高滴度的抗D-G1LF/M2及抗RSV IgG抗体和中和抗体,同时还诱导产生了RSV特异性的CTL应答;IgG的亚型IgG1/IgG2a的比值为2.66;用RSV攻击免疫后的小鼠,病毒滴定法检测肺部RSV滴度,结果表明D-G1LF/M2对小鼠肺部具有保护作用.
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