作者:严维巍; 崔治中; 王永坤兔出血症病毒衣壳蛋白基因毕赤酵母表达病毒样颗粒
摘要:将RHDV VP60基因插入酵母转移载体pPICZ B中转化毕赤酵母菌GS115株,经筛选获得染色体基因组中整合入VP60基因的重组酵母菌.以甲醇诱导培养后经SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,在60kD处出现一特异蛋白条带,表明RHDV的衣壳蛋白得到了成功表达.血凝试验表明,表达的重组蛋白具有血凝特性,可以凝集人"O"型红细胞,血凝价达28,同时,该血凝性可被抗RHDV的高免血清所抑制.经电镜观察,重组酵母表达的衣壳蛋白可以在酵母菌体内自聚成大小约40nm,和天然RHDV病毒子在物理形态上类似的病毒样颗粒(VLPs).该病毒样颗粒与兔抗RHDV高免血清作用后可被凝集成团,表明该VLPs与天然RHDV在抗原性上也极为相似.
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