作者：徐侠; 熊霞; 李冬玲; 肖玉成; 王贤纯; 梁...固相多肽合成突变体结构与功能
摘要：海南捕乌蛛毒素-IV(HNTX-IV)是从我国海南捕乌蛛粗毒中分离出的一种TTX-敏感型的钠离子通道阻断剂．由35个氨基酸残基组成，含3对二硫键。为了研究HNTX-IV结构与功能的关系，用芴甲氧羰基(Fome)固相多肽合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代HNTX-IV第12位丝氨酸(Ser12)的突变体S12A-HNTX-IV和替代第29位精氨酸(Arg29)的突变体R29A-HNTX-IV。合成的突变体经谷胱甘肽法氧化复性和纯化后，分别用MALDI-TOF质谱进行分子量鉴定，用一维核磁共振波谱法分析空间结构的变化，膜片钳电生理方法分析生物学活性。结果表明，Ser12和Arg29被Ala突变后没有明显影响分子的空间结构．S12A-HNTX-IV的生物学活性与天然HNTX-IV的相近，提示Serl2与HNTX-IV的生物学活性无关或关系不大；而R29A-HNTX-IV的生物学活性下降了155倍，说明Arg29是与HNTX-IV生物学活性相关的关键残基之一。推测R29A-HNTX-IV活性的降低是由于Ala替代Arg后改变了HNTX-IV与受体作用的位点，而不是由于毒素分子整体空间结构变化所致。
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