作者：刘红莉; 陈宏伟; 李文生; 雷霆; 王喆之; ...人乳头瘤病毒病毒样颗粒转基因烟草植物疫苗根瘤农杆菌
摘要：利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV-16 L1蛋白编码基因,将其重组于pUCmT和pBI121中,构建含HPV-16L1基因的植物双元表达载体pBI-L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达.采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草(Nicotiana tobacum L.),获得HPV-16L1转基因烟草植株.经PCR及Southern杂交分析,HPV-16L1基因整合到烟草基因组中;Western blot和ELISA分析检测显示转基因烟草叶片蛋白可与HPV-16 L1单克隆抗体特异性反应,且定位于55kD处,其最高表达量占烟草叶片总可溶蛋白的0.076%.小鼠红细胞凝集试验(HA)及小鼠红细胞凝集抑制试验(HAI)显示转基因烟草叶片蛋白可引起小鼠红细胞凝集.结果表明已成功地构建了HPV-16L1的植物双元表达载体,并证实了利用转基因烟草植物能够表达出HPV-16L1蛋白,所表达的L1蛋白具有良好的抗原性并具有介导小鼠红细胞凝集的生物活性.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
