作者：熊冬生; 郑梦杰; 刘银星; 许元富; 王金红...嵌和抗体发酵cd20凋亡b细胞淋巴瘤突变体大肠杆菌
摘要：构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,研究其在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的生物学活性.采用PCR法构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用19L发酵罐高密度发酵抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,采用亲和色谱和分子筛色谱法纯化表达产物,并用SDS-PAGE和薄层激光扫描鉴定纯化产物;采用活细胞间接免疫荧光法测定纯化产物与靶细胞的结合活性;MTT法测定纯化产物对Raji细胞的生长抑制作用,并研究其作用机理.DNA序列测定结果表明,抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体已成功构建,表达可溶性产物的产量达360 mg/L,具有与Raji细胞(CD20+)结合的活性,并抑制Raji细胞的生长,其作用机理为诱导Raji细胞凋亡.此突变体有望成为治疗非何杰金氏B细胞淋巴瘤的药物.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
