作者：李文生; 郑瑾; 刘红莉; 陈宏伟; 杨军; 王...截短型hpv58l1蛋白蛋白纯化病毒样颗粒
摘要：利用PCR技术克隆截短型HPV58 L1基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒pFastBac-Htb，通过转座反应，将目的基因片段重组入杆状病毒基因组，分离重组的Bacmid DNA，并转染Sf-9昆虫细胞，收集被转染的Sf-9细胞，提取细胞蛋白，SDS-PAGE检测可见在大约58Kda处出现一新生蛋白条带，Westem blot证实为HPV58L1蛋白。用PmBond^YM纯化系统纯化所表达的蛋白。小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集，透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP。结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型HPV58 L1蛋白，纯化后的截短型HPV58 L1蛋白在体外可自组装VLP，并具有介导小鼠红细胞凝集的生物学活性。
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