作者：赵洪亮; 薛冲; 熊向华; 张伟; 朱厚础; 刘...睫状神经营养因子巴斯德毕赤酵母蛋白酶抗性
摘要：AX15是一种比天然睫状神经营养因子具有更高的生物学活性、更好的稳定性和可溶性的hCNTF突变体.在巴斯德毕赤酵母中表达时AX15易发生降解.氨基酸序列分析表明降解位于由12和13位氨基酸残基组成的双碱性氨基酸之后.根据KEX2蛋白酶的底物专一性把双碱性氨基酸从RR变为RK,构建了KEX2抗性的AX15突变体AX15(R13K).AX15(R13K)的稳定性得到了显著的提高,在诱导100 h后也未发生降解.利用超滤浓缩和凝胶过滤得到了纯度＞90%的AX15(R13K).TF-1细胞存活实验表明AX15(R13K)具有与AX15相同的生物学活性.蛋白酶抗性人睫状神经营养因子突变体可能具有更好的体内稳定性,在临床应用上具有潜在的优势.
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