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鼻咽癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选

作者:舒峻; 李官成; 何小鹃鼻咽癌cdna文库抗原基因表达文库

摘要:构建人鼻咽癌组织cDNA文库,以SEREX方法从cDNA文库中筛选鼻咽癌抗原基因。采用确诊鼻咽癌患者新鲜活检癌组织构建cDNA文库,测定原始文库滴度,进行蓝白筛选以确定文库的重组率。以建库组织来源患者的自身血清,采用“一对一”的血清学方法筛选所构建的cDNA文库,阳性克隆经PCR检测鉴定后进行序列分析。经测定原始文库滴度为7.28×10^6pfu/mL,含3.64×10^6个重组子,重组率为94%,扩增文库滴度为3.8×10^9pfu/mL,cDNA插入片段大小在0.5~3.0kb之间。文库经三轮血清学筛选共获得23个阳性克隆,分别代表了16个独立的cDNA插入片段(抗原基因)。其中10个与已知基因高度同源,另外6个基因与GenBank中已知基因的部分同源,其中有3个是新基因。利用SMART技术构建了高质量的人鼻咽癌组织cDNA表达文库,有利于以cDNA文库为基础的进一步的实验研究。应用SEREX技术初步筛选鼻咽癌组织cDNA文库,共得到16个鼻咽癌相关抗原基因,其中有3个是新基因,可能为鼻咽癌的免疫学研究提供新的研究分子。

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生物工程学报

《生物工程学报》(月刊)创刊于1985年,由中国科学院主管,中国科学院微生物所;中国微生物学会主办,CN刊号为:11-1998/Q,自创刊以来,颇受业界和广大读者的关注和好评。 《生物工程学报》主要报道生物工程研究的新发展、新成果、新技术。刊登的内容包括:基因工程、细胞工程、酶工程、生化工程、组织工程、生物信息、生物制药、生物芯片等。

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