作者：苏中静; 陈海滨; 张锦堃; 徐岚; 刘少辉人脐带血人肝癌细胞dc疫苗杀伤活性淋巴细胞致敏活细胞细胞体积中性红
摘要：目的:制备人脐带血来源的树突状细胞(DC)疫苗,并观察其在体外对人肝癌细胞的杀伤活性.方法:rhGM-CSF100μg/mL、rhTNF-α 50u/mL诱导人脐带血CD34+干细胞向DC分化,用超声破碎的人肝癌细胞BEL-7402裂解物冲击DC,制备DC疫苗.活细胞计数和中性红比色法检测DC疫苗致敏的脐带血或外周血淋巴细胞在体外对BEL-7402的杀伤活性.结果:脐带血CD34+细胞在细胞因子诱导下,细胞体积增大,变为不规则形,细胞数量增多,形成细胞集落.在培养后期集落周围的细胞伸出长的树枝状突起并不断从集落脱落下来.活细胞计数和中性红比色法显示负载肿瘤抗原的DC致敏的淋巴细胞在体外对BEL-7402的杀伤活性明显强于未致敏的淋巴细胞(P＜0.01),DC致敏的脐带血来源淋巴细胞和DC致敏的外周血来源淋巴细胞的杀伤活性分别为44.09%和47.92%(P＞0.05).结论:人脐带血干细胞在细胞因子的诱导下扩增并分化为DC.经肝癌细胞裂解抗原致敏、人脐带血来源的DC疫苗,能增强淋巴细胞对相应人肝癌细胞的体外杀伤效应,而且DC疫苗对脐带血来源的初始型淋巴细胞和外周血来源的淋巴细胞有同样的激活作用.
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