作者：陈思琪; 谢丽霞; 姚朝瑞; 李大鹏; 汤蓉亚硝酸钠ire1通路细胞凋亡钙离子
摘要：为探究亚硝酸钠诱导草鱼肝细凋亡中内质网应激IRE1通路的作用,草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞L8824分别置于亚硝酸钠浓度为0、5、20和50 mg/L暴露12h和24h。同时采用三磷酸肌醇受体拮抗剂2-APB和IRE1α抑制剂STF-083010分别和20 mg/L亚硝酸钠共同孵育L8824细胞24h。检测细胞凋亡以及c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,jnk)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bcl-2 associated X protein,bax)、caspase9、caspase3、肌醇酶1α(inositol requiring enzyme 1α,ire1α)、X盒结合蛋白1s(X-box binding protein 1s,xbp1s)和葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,grp78)基因的表达和细胞质内钙离子浓度。结果表明:与对照组相比,亚硝酸钠处理组细胞凋亡率显著上升,jnk、bax、caspase9、caspase3、ire1α、xbp1s和grp78 mRNA的表达显著升高,bcl-2 mRNA的表达量显著下降,细胞质内钙离子浓度显著上升。与亚硝酸钠单处理组相比,STF-083010处理组细胞凋亡率显著下降,ire1α、xbp1s、grp78、jnk、bax、caspase3 mRNA表达量显著下降,bcl-2 mRNA表达量显著上升,2-APB和STF-083010两个处理组细胞质内钙离子浓度均显著下降。结果显示,高浓度的亚硝酸钠可诱导草鱼肝细胞凋亡和钙离子紊乱,内质网应激IRE1通路发挥了作用。
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