作者:任丽琦; 翁洁羊; 王鑫; 孙金生; 李冉米虾鞣化激素表皮鞣化蜕皮周期实时荧光定量pcrrna干扰
摘要:为探讨米虾鞣化激素在其蜕皮周期及表皮角质层形成过程中的作用,采用PCR技术克隆得到了米虾鞣化激素两个亚基基因的开放阅读框(ORF)序列。bursicon-αORF全长441 bp,共编码146个氨基酸;bursicon-βORF全长411 bp,共编码136个氨基酸。利用实时荧光定量PCR分析米虾整个蜕皮周期中鞣化激素2个亚基基因的表达特征,结果发现,鞣化激素bursicon-α和bursicon-β在米虾蜕皮周期的各个阶段的相对表达量存在差异,在蜕皮前期(D期)相对表达量开始上升,到D3期时相对表达量最高,蜕皮期E期相对表达量最低。RNA干扰(RNA interference,RNAi)介导bursicon-α和bursicon-β基因沉默后,发现米虾的蜕皮周期延长,表皮角质层明显变薄。结果提示,鞣化激素(Bursicon)与新形成的外骨骼中角质层的加厚与硬化密切相关,进而影响蜕皮时间。
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