作者:张云; 郭东春; 耿宏伟; 刘明番鸭呼肠孤病毒杆状病毒表达
摘要:经RT—PCR扩增了番鸭呼肠孤病毒S14株σC蛋白编码基因,将其克隆到pFastBacH—TA载体上,酶切鉴定及测序筛选出阳性重组载体pFastBacHTA-σC;将pFastBacHTA-σC转化到DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑和PCR筛选获得重组转座子rBacmid—σC。在脂质体介导下将rBacmid—σC转染sf-9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBV—σC;SDS—PAGE和Western blot分析表明:在sf-9细胞中表达了分子量约37kD的σC蛋白,并且该蛋白能与原核表达σC蛋白免疫小鼠制备的血清发生特异免疫反应,为今后以表达的σC蛋白作亚单位疫苗的研制奠定了基础。
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