作者:李湘玉; 刘秦华; 李君风; 白晰; T.Desta;...瑞氏木霉大肠杆菌分泌表达
摘要:采用重叠延伸PCR合成技术将乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)分泌蛋白基因序列usp45(81bp)和瑞氏木霉(Trichoderma reesei)β-1,4-葡聚糖内切酶成熟蛋白序列egl3(657bp)连接成融合基因usp45-egl3,构建了分泌型重组质粒pMG36e—usp45-egl3及重组大肠杆菌E.coli DH5α/pMG36e—usp45-egl3。分析重组大肠杆菌的表达效果及表达产物降解纤维素的能力。结果表明,重组大肠杆菌DH5α/pMG36e—usp45-egl3经14h培养能分泌酶活为226mU/mL的β—1,4-葡聚糖内切酶,并有效地降解了羧甲基纤维素钠、其中分泌的β—1,4-葡聚糖内切酶降解羧甲基纤维素钠生成还原糖的速率为2.35mg/(h·mL).
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