作者:Bernard; Gitura; Kimani; 杨套伟; 饶志...分泌表达酶学特征bacillussubtilis168
摘要:将γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在Bacillus subtilis 168同源过量表达,发现该酶能够自动分泌到细胞外,且重组菌酶活比原始菌提高了3 568倍。通过SDS-PAGE分析发酵液上清液发现,该γ-谷氨酰转肽酶是由一个相对分子质量为42 000的大亚基和一个22 000的小亚基组成。通过酶学性质分析发现,该γ-谷氨酰转肽酶是一个耐碱性的酶,最适反应pH为10;同时该酶具有良好的耐热性,最适反应温度达到50℃;另外,加入5.0 mmol/L的Mg~(2+)、Ca~(2+)、K~+、La~(3+)、Li~+和NH_4~+对GGT转肽活力具有明显的促进作用,其中添加的NH_4~+对GGT活力促进作用最为显著,GGT活力提高45%以上,而Cu~(2+)和Zn~(2+)则对其具有抑制作用。
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