作者:李聪; 刘健慧; 李志辉; 张敏; 高浩; 檀建...多重聚合酶链式反应蜡样芽孢杆菌金黄色葡萄球菌志贺氏菌沙门氏菌快速检测
摘要:为快速检测蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌和沙门氏菌4种食源性致病菌,建立4重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的检测方法。针对菌株的特异性基因设计引物,选择退火温度相近,扩增条带区间不同的引物为多重聚合酶链式反应引物组,并对多重PCR的引物浓度、退火温度进行优化,确定扩增条件。结果表明,在54℃的退火温度下,4种菌可扩增长度为246、166、65、107 bp的清晰片段,其检测灵敏度为蜡样芽孢杆菌2×10^1 CFU/mL,金黄色葡萄球菌可达1.3×10^2 CFU/mL,志贺氏菌可达1.3×10^2 CFU/mL,沙门氏菌可达1.4×10^2 CFU/mL。
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