作者：陈岩君; 窦文芳; 李恒; 史劲松; 许正宏褐藻寡糖凝胶分离receptorconvertasetype9
摘要：采用Isoptericola halotolerans CGMCC 5336褐藻胶裂解酶制备褐藻寡糖,通过液质联用技术(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)对其组成进行初步分析,后经过凝胶色谱柱对其进行分离、纯化,得到4种组分,分别命名为Fr1、Fr2、Fr3、Fr4。通过LC-MS分析各组分纯度并确定分子量,使用G-25凝胶柱进行脱盐。通过RT-PCR和Western Blot技术,研究所获得的4个组分对低密度脂蛋白受体(low-density-lipoprotein receptor,LDLR)基因和蛋白水平的调节作用以及对前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)蛋白水平的调节作用。结果表明,Fr1中含有2种聚合度的寡糖,为五糖和六糖;Fr2、Fr3和Fr4均为聚合度均一的寡糖,分别为四糖、三糖和二糖。4个组分中,Fr1、Fr3、Fr4均能显著上调LDLR的蛋白水平,其中Fr3和Fr4的活性尤为显著。Fr3能下调PCSK9的蛋白水平,推测Fr3对LDLR蛋白表达的上调作用可能与PCSK9有关。而Fr4对LDLR的上调作用与PCSK9无关,可能受固醇反应原件结合蛋白-2(SREBP-2)的调节。结果表明,Fr3和Fr4可开发作为食品添加剂用于降低血浆胆固醇。
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