作者：张燕; 魏汝君; 潘风光; 刘珍; 王寒松; 刘...蛋清源活性肽hek293细胞抑制氧化损伤谷胱甘肽细胞因子
摘要：食源性抗氧化肽安全性高,抗氧化能力较好,近年来成为多肽研究领域的热点。本实验以蛋清源抗氧化肽WNWAD（Trp-Asn-Trp-Ala-Asp）,及其拆分肽WNW（Trp-Asn-Trp）、WAD（Trp-Ala-Asp）、WN（Trp-Asn）、AD（Ala-Asp）为研究对象,首先采用2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2’-azino-bis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid）,ABTS）体外抗氧化评价方法,对5条肽的抗氧化活性进行了评价,建立H2O2诱导的人胚肾细胞（HEK293）氧化损伤模型,利用HEK293细胞模型评价5条肽的抗氧化活性,然后检测抗氧化肽WNWAD对细胞氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione,GSSG）含量的影响,最后利用酶联免疫吸附测定试剂盒检测了炎症因子人白细胞介素-8及人肿瘤坏死因子的含量。结果表明：活性肽浓度为40μmol/L时,WNWAD清除ABTS^＋·能力最强,Trolox抗氧化当量（Trolox equivalent antioxidant capacity,TEAC）为（98.411±0.020）μmol TE/L,其次为WN、WNW、WAD,其TEAC分别为（96.629±0.008）、（94.978±0.003）、（88.807±0.003）μmol TE/L,AD没有ABTS^＋·清除能力。在H2O2浓度为400μmol/L时,细胞相对存活率为（50.240±0.505）%,有高度显著性差异（P〈0.001）,不同浓度的蛋清源活性肽对H2O2诱导的HEK293细胞氧化损伤均有保护作用,且随着各条肽浓度升高保护作用呈增强趋势,其中WNWAD的保护作用最强,浓度为30μmol/L时,细胞存活率已高达99.12%。并且WNWAD可明显降低细胞中GSSG含量,降低炎症因子人白细胞介素-8和人肿瘤坏死因子的含量。以上研究结果显示蛋清源活性肽对降低HEK293细胞氧化应激水平、提高细胞抗氧化能力、抗炎能力等有重要作用。
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