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酪氨酸酶特异性卵黄抗体Fab’片段的制备及其对酶活力的抑制性能

作者:钟欣欣; 曹立民; 林洪; 史佩玉; 隋建新酪氨酸酶卵黄抗体蛋白酶解活性抑制

摘要:针对导致黑色素沉淀的酪氨酸酶,制备了特异性卵黄抗体Fab’片段,研究其对酶活力的抑制效果并从动力学角度进行分析。结果表明,胃蛋白酶法制备Fab’片段的最适条件为:pH 4.0、反应比(卵黄抗体-胃蛋白酶)1∶150(mg/U)、反应时间8 h。经免疫亲和柱纯化后可得理化性质稳定、纯度大于95%的Fab’片段;该片段通过非竞争性结合抑制酪氨酸酶活力,IC(50)为11.16μmol/L,结合常数为5.79×10~5,抑制效果相比完整的卵黄抗体分子大大提高。本研究可为卵黄抗体Fab’片段作为潜在的酶活力抑制剂在食品、化妆品和医药等行业中应用提供理论参考。

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食品科学

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