作者:徐艳; 郭倩; 朱益波; 王立梅; 齐斌紫外诱变苯基乳酸苯基乳酸耐受菌株大肠杆菌全细胞转化
摘要:苯基乳酸(phenyllacticacid,PLA)耐受性菌株的筛选能够有效降低PLA对生产菌株的抑制作用,有利于PLA产量的提高。通过紫外诱变的方法筛选耐受PLA的菌株,并应用于PLA的合成。以EscherichiacoliBL21(DE3)作为原始出发菌株,通过紫外诱变的方法诱变筛选获得一株耐受PLA突变菌株E.coliZ2016(CCTCC保藏编号M2016332)。以E.coliZ2016为宿主菌,分别构建了重组菌株E.coliZ2016pET-28a-ldhY52V和E.coliZ2016pET-28a-ldhL用于D-和L-苯基乳酸的合成。结果表明:E.coliZ2016在含有1g/LD-PLA的培养基中能够正常生长;重组突变菌株E.coliZ2016pET-28a-ldhY52V和E.coliZ2016pET-28a-ldhL全细胞合成D-PLA和L-PLA产量分别为6.75、6.97g/(L·h),较重组出发菌株分别提高了14.02%和8.95%;分批补加底物反应120min,E.coliZ2016pET-28aldhY52V得到的D-PLA为20.02g/L,较对照组提高22.17%,转化率为90.07%;E.coliZ2016pET-28a-ldhL得到的L-PLA产量为20.87g/L,较对照组提高16.85%,最终转化率为91.24%。筛选耐受性菌株是提高PLA产量的有效途径。
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