作者:刘小青; 严琼英; 陈国培; 王远洋; 肖承荣...副溶血性弧菌irgb等温扩增
摘要:目的:建立副溶血性弧菌的RPA-exo荧光探针快速检测方法。方法:采用重组酶聚合酶扩增技术,以irgB为靶基因设计副溶血性弧菌的RPA-exo引物探针,对引物探针进行组合筛选,建立RPA-exo荧光探针快速检测方法,并对其特异性、灵敏度、模拟污染实验及实际应用效果进行测试。结果:建立的方法15 min可获得结果,具有高特异性,无交叉反应;灵敏度为1.0×10^3 CFU/m L,DNA检测限为0.35 pg/μL,质粒检测限为1×10^3 copies/μL;模拟污染实验中加入终浓度为1.36×10^3 CFU/m L时,无需增菌即可被检出;实际样品检测中,10份水产品,有3份样品被检出,检测结果与国标GB 4789.7-2013结果一致。结论:本研究成功建立了副溶血性弧菌的RPA-exo快速检测方法。
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