作者：郝丹; 尤倩倩; 郝伟; 梁晓琳; 袁靖琳; 李...生长分化因子11重组质粒工程菌株稳定性
摘要：为了研究重组质粒pET28a-BMPll在基因工程菌E．coli B121（DE3）中的遗传稳定性，将重组菌E．coli BL21（DE3）／pET28a-BMPll液体转接传至100代，每隔20代取样观察菌落形态，检测菌体生长量、质粒保有率和目的蛋白表达水平，并对原代、第20代、第60代和第100代工程菌进行了Xho I和NdeI双酶切验证和目的基因测序。结果显示：各代菌生长量和菌体菌落形态与原代菌株无显著差异。在不含卡那霉素的条件下，传代进行到40代时，质粒保有率和蛋白质表达水平显著下降，第100代菌的质粒保有率仅为56％。在含有卡那霉素的条件下，第80代菌仍有较高的蛋白质表述水平，第100代菌酶切图谱和目的基因序列仍与原代保持一致，质粒保有率高达96％，说明利用重组大肠杆菌工业化生产BMPll是可行的，并且在培养基中添加卡那霉素能够让重组质粒在传代过程中保持稳定，为BMPll的大规模工业化生产和新型抗衰老食品的研发奠定了理论基础。
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