作者：李晶; 石斌超; 王晨阳; 赵志军; 史吉平大肠杆菌转运系统基因敲除克隆表达
摘要：近年来，转运系统改造已经成为氨基酸菌株菌种改良的重要手段。本研究以工业生产菌EscherichiacoilMT-01／pTrp-01为出发菌株，首先利用Red重组技术，在菌株MT-01／pTrp-01基因组上敲除了色氨酸吸收基因mtr，发酵结果表明，敲除敲除突变菌的L-色氨酸产量达到35．87g／L，与出发菌株E．coliMT-01／pTrp-01相比提高了32％；在此基础上，进一步考察了三种不同启动子（Pr，Ptac，PserA）控制下三-色氨酸分泌基因yddG的差异表达对菌体生长及菌株产三-色氨酸的影响。结果表明，当采用组成型启动子tac时，yddG基因的过表达菌株L-色氨酸的产量为41．01g／L，比mtr敲除菌株E．coliMT～11／pTrp-01的产量提高了14．3％，当采用温度诱导型启动予Pr调控yddG基因表达时，三-色氨酸的产量与刚r敲除菌株E．coliMT-11／pTrp-01的产量相比提高了9．3％，L-色氨酸的产量达到了39．22g／L；而采用基因serA的天然启动子调控yddG表达时，菌体的生长受到了明显抑制，三-色氨酸产量仅有27．1g／L的色氨酸。综上，大肠杆菌基因mtr的敲除和基因yJaG的过表达均可以有效提高工程菌株生产色氨酸的能力。
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