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绿色木霉产内切壳聚糖酶的鉴定及酶学性质的研究

作者:刘萍; 刘靖; 祁兴普; 夏文水绿色木霉壳聚糖酶酶学性质作用模式

摘要:以实验室前期从Trichoderma viride XW01微晶纤维素诱导的发酵液中分离纯化的一种新壳聚糖酶组分Csn为对象,采用SDS-PAGE分析、不同反应时间水解产物的粘度测定和薄层层析(TLC)分析、还原糖含量的测定等手段对壳聚糖酶Csn进行了初步鉴定及酶学性质研究,结果显示:Csn的分子量为45ku,最适作用温度和最适pH分别为60℃和pH5.0,在低于50℃、pH4.8~7.5范围内非常稳定;脱乙酰度DD对Csn的催化速率影响显著,其对83%DD的壳聚糖的催化活力最高;金属离子Mn2+、Mg2+、Ca2+、Zn2+对该酶有明显的促进作用,而Fe3+、Cu2+和Hg2+则对该酶有强烈的抑制作用;该酶的米氏常数为1.10mg/mL,最大反应速度为7.15μmol/mL·min;该酶以内切方式作用于壳聚糖,主要水解GlcNAc-GlcN和GlcN-GlcN之间的糖苷键,水解产物以四糖以上的壳寡糖为主。

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