酚酞单克隆抗体的制备

作者：谭攀; 吴鑫; 蔡杜曼; 胡金梅酚酞单克隆抗体酶联免疫吸附法

摘要：目的建立免疫学快速检测减肥类保健食品中非法添加的酚酞,制备酚酞单克隆抗体并进行评价。方法利用碳二亚胺(carbodiimide,EDC)法合成免疫原和包被原,用免疫原免疫Balb/C小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合。采用竞争结合双阳性两步筛选法,筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞;采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化,利用酶联免疫吸附法鉴定纯化后的抗体。结果成功合成了酚酞-BSA免疫原和酚酞-OVA包被原,筛选获得酚酞杂交瘤细胞株FT/BSA/2019,单克隆抗体的效价1×10^5。结论本研究初步建立了特异性高的酚酞单克隆抗体的制备方法。

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